《山西化工》
黄酮全称为黄酮类化合物,是植物中分布非常广泛的一类天然物质,具有抗心脑血管疾病、抗炎、抗免疫、抗微生物、保护消化性溃疡、抗肿瘤等作用。黄酮作为一种功效成分,越来越受到人们的重视。沙枣(Elaeagnusangustifolia)是胡颓子科胡颓子属落叶乔木或灌木,在山西省主要分布于黄土丘陵区和晋北风沙区,有研究报道沙枣是一种集生态效益与经济效益于一体的重要树种。因此,研究山西沙枣果肉中的总黄酮含量对进一步认识其经济价值具有重要意义,可为山西沙枣药用价值的开发提供参考依据。
1 材料与方法
1.1 材料
2017年10月,在山西省黄土丘陵区和晋北风沙区采集不同大小的沙枣果实,取果肉后自然阴干,用粉碎机研碎,于室温下保存备用。
1.2 仪器与试剂
仪器:721紫外可见分光光度计,上海第三分析仪器厂;BS110S型电子天平,北京赛多利斯仪器系统有限公司;Centrisart D-16C 实验室离心机,赛多利斯科学仪器(北京)有限公司;SB25-12超声波清洗器,宁波新芝生物科技股份有限公司。
试剂:芦丁标品,批号-,中国药品生物制品检定所。其余试剂均为分析纯。
1.3 方法
1.3.1 标准曲线的制作
准确称取20 mg芦丁,用无水乙醇溶解后,定容至100 mL容量瓶中,配制成浓度为0.2 mg/mL的标准溶液。在7个25 mL容量瓶中分别吸取标准溶液0.0 mL,0.5 mL,1.0 mL,2.0 mL,3.0 mL,4.0 mL,5.0 mL,之后在每个容量瓶中依次加入5%的NaNO2溶液0.3 mL,10%的Al(NO3)3溶液0.3 mL,4%的NaOH溶液4.0 mL.每加入1种溶液后要摇匀,并放置6 min,最后用60%的乙醇定容摇匀,放置15 min后,于498 nm波长处测定吸光度。
1.3.2 供试样品的制备
称取2.00 g沙枣果肉,按照料液比1∶22加入60%的乙醇溶液,在320 W功率下超声处理15 min,之后在4 000 r/min下离心10 min,取上清液至25 mL容量瓶中,用蒸馏水定容。取1 mL样液至25 mL容量瓶中,重复3次,按照标准曲线的制作方法在498 nm波长处测定吸光度,计算总黄酮含量。
2 结果与分析
2.1 标准曲线的绘制
用紫外可见分光光度计测定芦丁标准溶液吸光度值,见表1.
表1 芦丁标准溶液吸光度芦丁浓度/(mg·mL-1)吸光度
以芦丁浓度为X轴,对应的吸光度值为Y轴绘制标准曲线,如图1所示。
对芦丁浓度和吸光度值数据进行回归后,得线性方程式为:Y=14.698 0X+0.001 1,R2=0.998 0.
2.2 不同分布区沙枣果肉中的总黄酮含量
以测定样品的吸光度值为基础,根据标准曲线的线性方程计算山西沙枣两个分布区果肉中的总黄酮含量,如图2所示。
图1 芦丁吸光度标准曲线
图2 不同分布区沙枣果肉中的总黄酮含量
从图2可看出,黄土丘陵区沙枣果肉中的总黄酮含量(7.37 mg/g)高于晋北风沙区(6.21 mg/g)。对两个分布区沙枣果肉中的总黄酮含量运用SPSS 16.0统计软件中的One-way ANOVA模块进行方差分析,结果表明,沙枣果肉中总黄酮含量在两个分布区间差异不显著(p>0.05)。可见,沙枣分布的立地条件对其果肉中总黄酮含量的影响不明显。
2.3 不同大小沙枣果肉的总黄酮含量
将不同分布区的沙枣果实分别按照纵径、横径进行聚类分析,结果表明,两个分布区的沙枣果实均可分为大果、中果、小果3类。运用SPSS 16.0统计软件中的One-way ANOVA模块对两个分布区不同大小沙枣果实果肉中的总黄酮含量进行方差分析,并用Duncan法对其进行多重比较,结果见表2.
表2 不同大小沙枣果实果肉总黄酮含量mg/g黄土丘陵区晋北风沙区大果12.中果8.小果5.注:表中数据为平均值±标准差;同一列数据后有相同字母者表示在0.05水平上差异不显著
从表2可以看出,两个分布区不同大小沙枣果实果肉中总黄酮含量变化规律不一致。黄土丘陵区沙枣果肉中总黄酮含量呈现出随着果实的增大而增加的趋势,晋北风沙区沙枣果肉中总黄酮含量则表现为随着果实的增大而减少的趋势。黄土丘陵区大果中的总黄酮含量明显高于中果和小果的总黄酮含量,中果和小果果肉中总黄酮含量差异不显著;晋北风沙区大果中的总黄酮含量明显小于中果和小果的,但中果和小果果肉中总黄酮含量差异不显著。
3 结论
山西黄土丘陵区沙枣果肉中的总黄酮含量高于晋北风沙区,但两者间差异不显著,即立地条件对沙枣果肉中总黄酮含量的影响不明显。果实大小对果肉中总黄酮含量的变化有显著影响,黄土丘陵区沙枣果肉中总黄酮含量呈现出随着果实的增大而增加的趋势,晋北风沙区的则表现为随果实的增大而减少的趋势,但中果和小果果肉中的总黄酮含量间均无显著差异。
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